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1、分子检测实验室主要包括:试剂贮存和准备区、样品制备区、核酸制备区、扩增区及扩增产物分析区。
2、1)分子检测实验室的通风要求实验室建设对于实验室通风要求非常严格,一般实验室通风按照通风系统作用范围可分为全面通风和局部通风。
3、全面通风是对整个房间进行通风换气,局部通风是采取局部气流,使局部地点不受有害物的污染,从而营造良好的工作环境。
4、实验室一般采用机械通风以及机械补风或自然补风相结合的形式。
5、在通风系统设计时,先考虑局部通风,若达不到要求,再采用全面通风,局部通风可以保证在实验地点合理有效地排除有害物质,全面通风用来排除散发及残存在实验室中的有害物质,以保证实验室的卫生环境。
6、另外还要考虑建筑设计和自然通风的配合。
7、实验室通风系统技术参数:a实验室的通风换气次数每小时8-15次。
8、b支管内风速6-8m/s,干管内风速8-12m/s。
9、c通风柜面风速一般控制在0.3~0.8 m/s,验收标准一般0.5m/s .d室外噪声应该控制在70 dB(A)和实验室内噪声应该控制在55 dB(A),如果不能控制在此范围内,通风系统末端必须配有消声器。
10、2)分子检测实验室的压力要求a 试剂贮存和准备区主要功能:原装试剂和配制试剂的贮存,所有试剂的配制与分装。
11、工作区域的压力要求:未设缓冲间的试剂贮存和准备区,工作区域为正压。
12、注意事项:当试剂经质检合格后,应将其分装贮存备用,贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数决定。
13、用于扩增的试剂应冰冻贮存。
14、b 样品制备区主要功能:实验室样品的混样和测试样品的制备。
15、工作区域的压力要求:未设缓冲间的样品制备区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
16、注意事项:此区应远离其它实验操作区;粉碎样品时的器皿应单独使用,所用的器具在使用前应经过彻底清洗并高压消毒,防止交叉污染;称取的测试样品应加盖后再移至样品核酸制备区。
17、c 核酸制备区主要功能:核酸的提取纯化与贮存;核酸含量的测定;测试样品DNA的保存。
18、工作区域的压力要求:未设缓冲间的核酸制备区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
19、注意事项:已纯化的核酸应保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融;阳性和阴性标准物质DNA可调整至常用的使用浓度后分装并冷冻保存d 扩增区主要功能:PCR扩增反应体系的配制和模板的加入,核酸扩增。
20、工作区域的压力要求:未设缓冲间的扩增区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
21、注意事项:严格限制无关人员出入并减少在本区内走动;加样应在超净工作台(生物安全柜)内进行,超净工作台的气流方向宜选择垂流式;巢式PCR的第二次加样必须在此区进行。
22、e 扩增产物分析区主要功能:扩增产物的测定工作区域的压力要求:未设缓冲间的扩增产物区,工作区域为负压或减压,应安装排风系统。
23、注意事项:此区是最主要的扩增产物污染来源,应远离其它实验操作区;使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时,应使用洗板机洗板。
24、若实验仅采用全自动扩增检测仪(如实时荧光定量PCR仪),可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。
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